Metabolismo de la bilirrubina

Se conoce como bilirrubina a un pigmento de origen biliar y tonalidad amarillenta que surge como resultado de la descomposición de la hemoglobina. Se trata de una biomolécula nacida tras la rotura de la membrana celular del eritrocito y la liberación de hemoglobina, que es fagocitada por los macrófagos del organismo.

En el suero existe normalmente una pequeña cantidad de bilirrubina que se eleva cuando se produce una destrucción excesiva de eritrocitos o cuando el hígado no logra excretar las cantidades suficientes de bilirrubina producida.

-La bilirrubina se produce en el bazo por degradación del componente hemo de la hemoglobina.

-En el hígado la bilirrubina se conjuga con acido glucuronico.

-Estos pigmentos se almacenan en la vesícula biliar formando parte de la bilis (es excretada hacia el duodeno, lo que da el color a las heces).

EXISTEN DOS TIPOS DE BILIRRUBINA EN EL ORGANISMO:

La bilirrubina indirecta o no conjugada

La bilirrubina, denominada también bilirrubina no conjugada o indirecta, circula en el plasma unida a la albúmina. Normalmente en estas condiciones no atraviesa la barrera hemato-encefálica. Puede aparecer bilirrubina no conjugada libre (no unida a la albúmina) en condiciones en que la cantidad de bilirrubina supera la capacidad de unión de la albúmina. Esto puede ocurrir porque hay cifras muy altas de bilirrubina, hipoalbuminemia o presencia de sustancias y factores que desplazan o debilitan la unión de la bilirrubina con la albúmina.

La bilirrubina directa o conjugada

Se filtra libremente por el riñón, no esta unida a la albumina, es hidrofilica y se encuentra ligada al ácido glucuronico.

También esta la BILIRRUBINA TOTAL:
Esta dada por las dos fracciones, la bilirrubia conjugada o directa y la bilirrubina no conjugada, constituye esta el 70 a 85% de la bilirrubina total

PATOLOGIAS

Cuando la bilirrubina se acumula en la sangre a un nivel mayor a 2,5 mg/dl, aproximadamente, se produce ictericia (despigmentación de la piel y de la esclera del ojo), porque el hígado, a causa de una deficiencia u obstrucción de los conductos biliares, no puede procesar los glóbulos rojos con la rapidez que se descomponen.

-Estenósis biliar

-Calangiocarcinoma

-Colangitis

-Coledocolitiasis

-Anemia hemolítica

-Encefalopatía hepática

-Anemia aplásica idiopática

-Anemia aplásica secundaria

-Anemia hemolítica inmune inducida por drogas

-Púrpura trombocitopénica trombótica

-Anemia hemolítica inmune, entre otras.

TÉCNICA COLORIMÉTRICA

 Fundamento

El ácido sulfanílico diazotado transforma la bilirrubina en azobilirrubina coloreada que se determina fotométricamente. De las dos fracciones de bilirrubina presentes en suero, glucuronato de bilirrubina y bilirrubina libre asociada a albúmina, sólo reacciona directamente la primera, mientras que la bilirrubina libre precisa ser disociada de la proteína por un acelerador para que reaccione. La bilirrubina indirecta se calcula por diferencia entre la bilirrubina total (con acelerador) y la directa (sin acelerador).

Los conceptos «directa» e «indirecta» se refieren exclusivamente a las características de reacción en presencia o ausencia de aceleradores o solubilizantes y equivalen sólo de forma aproximada a las dos fracciones de bilirrubina citadas.

Muestras

Suero reciente libre de hemólisis (Proteger de la luz hasta su ensayo).

Equipo adicional 

-Fotómetro o colorímetro para mediciones a 540 ± 20 nm.

-Unidad termostatizada ajustable a 37ºC. Realizar el ensayo a la misma temperatura para el calibrador, controles y muestras.

-Pipetas de volumen variable para reactivos y muestras.

 *BILIRRUBINA TOTAL

1. Pipetear en tubos rotulados:

2. Mezclar por completo y dejar reposar los tubos a temperatura ambiente durante 2 minutos.

3. Leer la absorbancia (A) de los blancos de muestra a 540 nm frente a agua destilada.

4. Leer la absorbancia (A) de las muestras a 540 nm frente al blanco de reactivo.

 El color es estable como mínimo 60 minutos a temperatura ambiente.

 *BILIRRUBINA DIRECTA

1. Pipetear en tubos rotulados:

2. Mezclar por completo y dejar reposar los tubos durante exactamente 5 minutos a 37ºC.

3.Leer la absorbancia (A) de los blancos de muestra a 540 nm frente a agua destilada.

4.Leer la absorbancia (A) de las muestras a 540 nm frente al blanco de reactivo.

Valores normales

Bilirrubina directa: 0 a 0.3 mg/dL.

Bilirrubina total: 0.3 a 1.9 mg/dL.

Bilirrubina indirecta: 0.1 – 0.5 mg/dl